期刊简介
本刊由上海第二医科大学主办、上海瑞金医院承办的《诊断学理论与实践》杂志将于2002年3月起公开发行。本刊为季刊，CN：31-1876/R,ISSN:1671-2870,大工业6开，64页，铜版纸印刷，每册6.5元，每期发行6500册，本刊拥有全国著名的名学科专家组成的编委会队伍，以拓宽临床实验诊断循证思路为宗旨，内容涉及检验、放射、B超、病理、内镜、EKG和临床诊断等。每期将重点围绕某一系统疾病介绍上述各专业的最新技术与进展。设有栏目：述评、论著、临床研究、综述与讲座、典型、疑难病例分析、教育园地和信息专栏等。欢迎各位踊跃来稿或征订。
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- 杂志名称：诊断学理论与实践杂志
- 主管单位：上海交通大学
- 主办单位：上海交通大学医学院附属瑞金医院
- 国际刊号：1671-2870
- 国内刊号：31-1876/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏
DAG方案对HL-60细胞株作用机制的体外研究
倪蓓文；陈芳源；钟济华；王海嵘；钟华；韩洁英
关键词：DAG方案, 细胞凋亡, 细胞坏死, 代谢酶, HL-60细胞株
摘要：目的:从细胞水平探讨柔红霉素(DNR)和阿糖胞苷(Ara-C)联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)(DAG方案)能否提高抗肿瘤效果,并研究相应的作用机制.方法:以白血病细胞株HL-60为实验对象,分为DA方案组、DAG方案组和对照组3组.对照组不加任何药物;DA方案组为DNR加Ara-C;DAG方案组为DNR加Ara-C和G-CSF(G-CSF先于化疗药物前24 h加入).药物作用24、48 h后收集细胞,对各组分别进行细胞计数、细胞形态观察,并采用MTT法检测不同组别细胞株的生长抑制率,采用流式细胞仪检测细胞早期凋亡比例、细胞坏死比例.另对HL-60细胞单用G-CSF作用24 h后进行细胞周期分析,并行实时定量PCR以检测细胞内Ara-C相关代谢酶基因表达情况的变化.结果:化疗药物作用后,相对于对照组,DAG方案组与DA方案组细胞数量明显减少,形态显示有明显细胞核固缩现象,且可见凋亡小体形成.DAG方案组与DA方案组相比,前者细胞生长抑制率更高(作用48 h,为78.3%比72.1%)(P＜0.01).细胞凋亡分析显示,与DA方案组相比,DAG作用24 h后早期凋亡百分率增高(9.43%比7.52%),且差异有统计学意义(P＜0.05);作用48 h后,2组早期凋亡比例均下降.与对照组相比,DAG方案组与DA方案组细胞坏死百分率在药物作用24 h和48 h后均显著增高(DAG方案组分别为44.16%和57.59%:DA方案组分别为41.54%和58.22%),但2组间差异无统计学意义.相对于作用前,G-CSF单独作用HL-60 24 h,细胞周期分析显示,S期细胞比例增高[(39.91±1.16)%比(31.42+1.47)%](P＜0.05);实时定量PCR检测,细胞内Ara-C代谢酶中脱氧胞苷激酶(DCK)的基因表达增高,5'-核苷酸酶(5'-NT)基因表达减少,差异有统计学意义(P＜0.05),而CDD的基因表达差异无统汁学意义.结论:G-CSF联合DA方案能显著提高对HL-60细胞株生长的抑制率,其作用机制主要为促肿瘤细胞坏死,轻度促细胞凋亡;联合G-CSF可促使白血病细胞进入S期的比例增高,同时使细胞内DCK基因表达增高,可能增强活性形式三磷酸阿糖胞苷(Ara-CTP)的生成,从而增强了Ara-C的细胞毒性作用.
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