期刊简介
本刊由上海第二医科大学主办、上海瑞金医院承办的《诊断学理论与实践》杂志将于2002年3月起公开发行。本刊为季刊，CN：31-1876/R,ISSN:1671-2870,大工业6开，64页，铜版纸印刷，每册6.5元，每期发行6500册，本刊拥有全国著名的名学科专家组成的编委会队伍，以拓宽临床实验诊断循证思路为宗旨，内容涉及检验、放射、B超、病理、内镜、EKG和临床诊断等。每期将重点围绕某一系统疾病介绍上述各专业的最新技术与进展。设有栏目：述评、论著、临床研究、综述与讲座、典型、疑难病例分析、教育园地和信息专栏等。欢迎各位踊跃来稿或征订。
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- 杂志名称：诊断学理论与实践杂志
- 主管单位：上海交通大学
- 主办单位：上海交通大学医学院附属瑞金医院
- 国际刊号：1671-2870
- 国内刊号：31-1876/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏
白念珠菌CDR1和CDR2多克隆抗体制备及鉴定
刘锦燕；魏冰；史册；阎亚昕；项明洁
关键词：多克隆抗体, 制备, 鉴定
摘要：目的:制备特异性白念珠菌外排泵(CaCDR1和CaCDR2)的多克隆抗体,为研究CaCDR1和CaCDR2在介导白念珠菌耐药中的作用奠定基础.方法:利用Pfam网络预测程序和Blastn、Blastx程序设计引物,采用PCR法获得白念珠菌SC5314基因组上486 bp长度的CDR1和CDR2目的基因,并将其克隆入pET-28a(+)质粒,构建重组表达质粒后,转化人大肠埃希菌BL21宿主菌内,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达6×His融合蛋白；经镍柱纯化蛋白后,免疫新西兰兔,制备兔抗多克隆抗体.用ELISA及蛋白印迹法检测该抗体的效价和特异性.结果:ELISA法检测所制备抗体的效价终定为1∶12 800,工作浓度定为1∶800;蛋白印迹法检测结果显示,抗体能与CaCDR1及CaCDR2蛋白特异性结合.结论:成功获得具有较高效价和良好特异性的CaCDR1、CaCDR2多克隆抗体,可用于白念珠菌CaCDR1、CaCDR2蛋白水平的鉴定.
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